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《植物生理学报》 2017, 53 (7): 1234-1244

紫花苜蓿叶酸合成关键酶GCHI和ADCS编码基因的克隆及分析

杨宝萍*, 郭欢*, 施颖, 冯文锦, 李婵, 包爱科**
兰州大学草地农业科技学院, 草地农业生态系统国家重点实验室, 兰州730020

 

摘要:
GTP环化水解酶I (GCHI)与氨基脱氧分支酸合酶(ADCS)是植物叶酸合成途径的限速酶, 对叶酸的合成起着至关重要的作用。本研究利用cDNA末端快速扩增技术(RACE)结合逆转录PCR方法, 克隆获得了紫花苜蓿(Medicago sativa)的GCHI和ADCS编码基因, 分别命名为MsGCHIMsADCS。序列分析结果表明, MsGCHI基因全长1 752 bp, 包含1 371 bp的开放阅读框(ORF), 编码456个氨基酸; MsADCS基因全长3 324 bp, ORF为2 613 bp, 编码870个氨基酸。经同源比对与进化树分析, MsGCHIMsADCS基因编码的氨基酸与蒺藜苜蓿(M. truncatula)的MtGCHI和MtADCS氨基酸序列具有最高的同源性, 分别达到98%和96%, 与其他植物的氨基酸序列相似度也均在58%以上。实时定量荧光PCR分析结果表明, MsGCHIMsADCS基因在紫花苜蓿的根、茎、叶中均有表达, 但在叶中的表达量都为最高。

关键词:紫花苜蓿; 叶酸; GCHI; ADCS; 基因克隆

收稿 2017-03-16  修定 2017-05-05

资助 国家自然科学基金(31670405和31372360)和兰州大学中央高校基本科研业务费专项资金(lzujbky-2016-4)。

* 通讯作者 (E-mail: baoaik@lzu.edu.cn; Tel: )。

 

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