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《植物生理学报》 2017, 53 (7): 1259-1266

桃ABA信号关键基因PpABI5酵母单杂交文库构建及其上游转录因子的筛选

郇蕾, 王旭旭, 陈修淼, 文滨滨, 谭秋平, 陈修德, 高东升, 李玲*, 付喜玲*
山东农业大学园艺科学与工程学院, 作物生物学国家重点实验室, 山东泰安271018

 

摘要:
脱落酸(ABA)在植物的生长发育中起着重要的作用, ABI5是响应ABA信号的关键基因, 研究调控ABI5基因表达的转录因子对进一步阐述ABA信号转导及调控具有重要意义。本研究中, 将3-AF1、Box I和Sp1三次重复串联后连接到pAbAi诱饵质粒上, 转化酵母细胞构建诱饵载体, 构建桃(Prunus persica)酵母单杂交cDNA文库, 再共转化诱饵菌株, 经同源重组筛选PpABI5启动子的上游转录调节因子。构建的cDNA文库库容为1×107 CFU, 插入片段长度平均在1 500 bp左右。酵母单杂交筛选结果经测序和Blast同源性分析, 获得PpDAM3和PpDAM5两个转录因子。酵母单杂交进一步证实PpDAM3和PpDAM5能与PpABI5启动子结合。这些研究结果表明, PpDAM3和PpDAM5可能参与调控PpABI5的转录, 并为深入研究ABA信号转导通路奠定基础。

关键词:ABI5; 桃; 启动子; 酵母单杂交; 转录因子

收稿 2017-03-06  修定 2017-06-16

资助 国家自然科学基金(31672137)和山东省自然科学基金(ZR2014CM015)。

* 通讯作者 (E-mail: lilingsdau@163.com; xilingfu@sdau.edu.cn; Tel: )。

 

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